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Il dipinto fu commissionato nel 1495 e completato nel 1497. La rappresentazione di Leonardo da Vinci raffigurava il momento immediatamente dopo che Cristo disse: “Uno di voi mi tradirà”. Leonardo respinse l’interpretazione classica della composizione e raffigurò Gesù in mezzo agli Apostoli, raffigurati e suddivisi in quattro gruppi di tre figure su entrambi i lati di Cristo. I 12 apostoli reagirono in modi diversi; i loro movimenti ed espressioni sono magnificamente catturati nell’opera di Leonardo. Il genio dell’artista si vede soprattutto nell’uso della luce e della prospettiva accentuata. Sfortunatamente, Leonardo non lavorò ad affresco ma a tempera su una superficie di intonaco a due strati che non assorbiva la vernice.